Extraktion von DNA - Molekularbiologische Methoden in der Lebensmittelanalytik - page 27

nen) abschätzen. Daneben kann gleich die Qualität der Extraktion auf dem Agaro-
segel beurteilt werden [4] .

3.3 DNA-Extraktion aus tierischen und pflanzlichen Geweben

Im folgenden Abschnitt werden verschiedene Extraktionsmethoden für tierische
und pflanzliche Gewebe vorgestellt.

3.3.1 DNA-Extraktion aus tierischen Geweben

In einer Studie der Food Standards Agency [11] wurden für die Extraktion von
DNA aus tierischen Geweben verschiedene DNA-Extraktionsmethoden getestet.
Hierzu wurden sieben kommerzielle Kits zur Extraktion von DNA aus Truthahn,
Huhn, Schwein und Rind getestet und hinsichtlich ihrer Handhabbarkeit, Ausbeute,
Qualität und Reinheit der extrahierten DNA bewertet. Den Kits liegen, obwohl sie
alle dazu bestimmt sind, reine DNA aus Muskelgewebe zu isolieren, unterschied-
liche Extraktionsstrategien zugrunde. Um die Variabilität zu minimieren und einen
leichten Transfer in andere Laboratorien zu ermöglichen, wurden ausschließlich
kommerzielle Kits evaluiert.
Folgende Kits wurden verwendet:

• Wizard ® DNA Clean-Up System, Promega,

• Wizard ® Magnetic DNA Purification System for Food, Promega,

• GenElute™ Mammalian Genomic DNA Kit, Sigma-Aldrich Chemie GmbH,

• DNeasy™ Tissue Kit, Qiagen GmbH,

• Midas Genomic DNA Kit, Biogene,

• Midas Forensic DNA Kit, Biogene und

• GenomeStar™ Kit, Thermo Hybaid GmbH.

3.3.1.1 Kurzbeschreibung und Vergleich der Verfahren

Die Kits der Firma Sigma und Qiagen verwenden Silica-Gel und Spin Column zum
Binden und Immobilisieren der DNA, wohingegen das Wizard DNA Clean-Up Sys-
tem Silica-Gel in einer Suspension verwendet. Der Wizard Magnetic DNA Purifi-
cation Kit für Nahrungsmittel basiert auf der Magnetic-Bead-Technologie. Die Kits
der Firma Biogene und Hybaid verwenden pufferbasierte Ansätze, um die DNA zu
isolieren.
Die Verwendung von organischen Lösungsmitteln ist, wie bereits beschrieben,
mit einem höheren Risiko für den Anwender verbunden. Dennoch kommen sie in