Analytik von Lebensmittelallergenen - Molekularbiologische Methoden in der Lebensmittelanalytik - page 185

lutine Ara h6 und Ara h7 und ein Profilin Ara h5, ein Panallergen [ 105 ]. Die analy-
tischen Methoden zur Bestimmung von Erdnuss bzw. Erdnussprotein in Lebensmit-
teln reichen von Rocket Immunoelectrophorese (RIE), Radioallergosorbent Assay
(RAST), Radioimmunoassay (RIA) über chromatographische Methoden (LC-MS-
MS), Dipstick und Lateral Flow Assays bis zu ELISA- und PCR-Methoden [ 6 ].
Der erste ELISA zum Nachweis von Erdnuss, ein Sandwich-ELISA, wurde von
Hefle et al. beschrieben und hat eine Nachweisgrenze von 40 mg/kg Erdnussprotein
in verschiedenen Lebensmitteln [ 106 ]. Weitere Sandwich- und auch kompetitive
ELISA-Verfahren wurden entwickelt und erreichen Nachweisgrenzen zwischen 2
und 0,1 mg/kg Erdnuss [ 107 - 111 ]. Daneben sind spezifische Real-Time-PCR-Me-
thoden beschrieben, die Nachweisgrenzen von 2 bis 10 mg/kg Erdnuss in Lebens-
mitteln erreichen [ 112 - 114 ]. Weiterhin können Erdnüsse mittels LPA zusammen
mit neun weiteren allergenen Lebensmittelzutaten nachgewiesen werden [ 99 ].

11.3.12 Nachweis von Sellerie in Lebensmitteln

Bei europäischen Erwachsenen ist eine Allergie gegen Sellerie die am häufigsten
auftretende Allergie [ 115 ]. In Frankreich und der Schweiz reagieren 30-40 % der
Lebensmittelallergiker auf Sellerie. In einer doppelblinden, plazebokontrollierten
Studie wurden ab 0,7 g Sellerie bzw. 0,16 g Selleriesamen allergische Reaktionen
beobachtet [ 116 , 117 ]. Das Hauptallergen des Selleries, Api g 1, ist homolog zum
Hauptallergen der Birke, Bet v 1, weshalb Birkenpollenallergiker häufig auf Selle-
rie allergisch reagieren.
Bisher gibt es keinen ELISA-basierten Nachweis zur Detektion von Sellerie,
es wurde jedoch bereits eine Reihe verschiedener PCR-Methoden veröffentlicht.
Eine Endpunkt-PCR mit anschließender Restriktionsanalyse zum Nachweis der
Api-g1-kodierenden Sequenz ermöglicht den Nachweis von 10-100 mg/kg Sel-
lerie in Lebensmitteln [ 118 ]. Das Api-g1-Gen dient auch für eine real-time PCR
als Zielsequenz [ 119 ]. Bei einer weiteren Endpunkt-PCR [ 120 ] zum Nachweis des
Mannitoldehydrogenasegens liegt die Nachweisgrenze bei 1.000 mg/kg. Das Man-
nitoldehydrogenasegen des Selleries ist auch Zielsequenz einer real-time PCR mit
einer Nachweisgrenze von 5-10 mg/kg sowie einer weiteren real-time PCR mit
einer Nachweisgrenze von 10-100 mg/kg [ 25 , 121 ].

11.3.13 Nachweis von Senf in Lebensmitteln

Nachdem die Häufigkeit allergischer Reaktionen auf Senf zunimmt [ 122 ], steigt
auch der Bedarf an Nachweismethoden. Bereits 1 mg Senf kann allergische Reak-
tionen hervorrufen [ 123 ]. Diese Menge entspricht 0,3 mg Protein. Das Hauptaller-
gen des Senfs ist Sin a 1 [ 124 ] in Sinapis alba (weißer Senf) und Bra j 1 in Brassica
juncea (brauner Senf). Verschiedene ELISA-Methoden zur Quantifizierung von Sin