Die Untersuchung auf gentechnische Veränderungen („GVO-Analytik“) - Molekularbiologische Methoden in der Lebensmittelanalytik - page 153

oder der Roundup-Ready ® -Sojabohne (RRS) wurden beschrieben [ 26 , 27 ] (s. auch
Abschn. „Genotypischer Nachweis“) und validiert [ 23 ]. Die Verfahren beruhen auf
der qualitativen PCR (= Endpunkt-PCR), die Detektion erfolgt in der Regel mittels
Ethidiumbromid nach elektrophoretischer Auftrennung im Agarosegel.
Um auch einen Nachweis in erhitzten oder anderweitig prozessierten Lebensmit-
teln zu ermöglichen, wird die Fragmentgröße der Zielsequenzen für den Nachweis
möglichst gering gewählt, in der Regel deutlich unter 200 bp, im Idealfall zwischen
60 und 150 bp [ 23 ].
In Abb. 10.5 ist beispielhaft der Nachweis von RRS in Sojalecithin dargestellt
[ 19 ]. Es ist erkennbar, dass auch aus Sojalecithinen noch für Soja (links, Bahnen 2
bis 4) und auch für gentechnisch veränderte Soja (rechts, Bahnen 3 und 4) charak-
teristische Fragmente amplifiziert werden können.
Bei negativen Befunden (rechts, Bahnen 2 und 5) ist allerdings keine Aussage
möglich, ob das Erzeugnis nicht kennzeichnungspflichtig im Sinne der EU-Ver-
ordnungen 1829/2003 bzw. 1830/2003 ist. Danach können nur Anteile unter 0,9 %
von einer Kennzeichnung befreit werden. Auch ist im Falle eines Nachweises von
Soja-DNA (links, Bahnen 2-4) in den Lecithinen nicht gewährleistet, dass ein sen-
sitiver Nachweis von RRS-Anteilen unter 0,9 % überhaupt möglich ist. Dies kann
allein anhand von quantitativen Methoden erfolgen, bei denen auch die Menge an
amplifizierbarer Spezies-DNA bestimmt wird (s. unten).

1 2 3 4 5 1 2

3 4 5

145 bp

172 bp

Soja-Lectin-PCR „Roundup Ready“-PCR

Abb. 10.5 Qualitative (= Endpunkt-PCR) zum Nachweis gentechnisch veränderter Soja in
Sojalecithin [ 19 ]. Agarosegel-Elektrophorese nach Amplifikation eines 145 bp-Abschnitts des
Soja-Lectin-Gens (Amplifikationskontrolle der extrahierten DNA) ( links ) bzw. einer für das
Roundup-Ready ® -Soja (RRS)-Konstrukt spezifischen Sequenz (172 bp) ( rechts ). Links und rechts
außen: 50-bp-Leiter; 1 = Positivkontrolle (1 % RRS, Matrix Sojamehl), 2-5 = Rohlecithinproben