Die Untersuchung auf gentechnische Veränderungen („GVO-Analytik“) - Molekularbiologische Methoden in der Lebensmittelanalytik - page 148

Neu eingefügte DNA-Sequenz

CaMV 35 S
P romotor Reis- Genom bar Gen Nos Terminat or Reis- Genom

Screening

Konstruktspezifisch

Eventspezifisch

Abb. 10.2 Prinzip des molekularbiologischen Nachweises gentechnischer Veränderungen am
Beispiel von gv Reis LL601. Mithilfe von Screeningverfahren lassen sich in der Gentechnik häu-
fig verwendete genetische Elemente (z. B. CaMV 35S Promotor, bar-Gen oder nos-Terminator)
nachweisen. Der konstruktspezifische Nachweis beinhaltet bei dem LL601-Reis die überlappende
Sequenz vom CaMV 35S Promotor in das bar-Gen. Für den eventspezifischen Nachweis wird die
Integrationsstelle der neu eingefügten DNA in das Reis-Genom verwendet

HindIII 155
BamHI 436
EcoRI 454

BgIII 10187

P-nptII

NOS 3'

nptII

BamHI 1624

CP4 EPSPS

BgIII 2058
EcoRV 2177

ori-pUC

CTP4

P-E35S

PV-GMGT04
10511 bp

NO S 3'

HindIII 2707

BamHI 7781
EcoRI 7763

7S 3'

BamHI 3160
EcoRI 3181

CP4 EPSPS

CTP4

GUS:1

P-FMV

BamHI 6593

P-MAS

EcoRV 4256
EcoRV 4487

BgIII 6159

EcoRI 6087

BgIII 5048

EcoRI 5684

BamHI 5535

Abb. 10.3 Plasmid-Karte des Vektors PV-GMGT04, der zur Transformation der Roundup-
Ready ® -Sojabohne verwendet wurde. Erläuterungen zu wichtigen Sequenzabschnitten: P-e35S =
35S Promotor aus Blumenkohlmosaikvirus (P35S), NOS 3′ = Nopalinsynthase 3′ Transkriptions-
terminator aus Agrobacterium tumefaciens (T-nos), CTP4 = Chloroplasten-Transitpeptid-Sequenz
aus Petunia hybrida ; CP4 EPSPS = Enol-Pyruvyl-Shikimat-Phosphat-Synthase-Gen aus Agrobac-
terium sp. 4