Einleitung - Protein-Microarrays fur die Wirkstoffentwicklung - page 2

pathogene Proteine das Kontrollsystem der Hitzeschockproteine für ihre Ak-
tivierung oder Maturation aus. 4 Auch bei der Pathogenese der H. pylori -ver-
mittelten Gastritis, spielt das Hitzeschockkontrollsystem eine große Rolle un-
dist ein interessanter Ansatz zur Bekämpfung der mit H. pylori verbundenen
Krankheiten. 5
In den letzten Jahren wird unermüdlich nach Inhibitoren für das humane
Hitzeschockprotein Hsp90α gesucht, weil es in Tumorzellen in erhöhter Men-
ge vorkommt und für das Überleben der Tumorzellen bedeutend ist. Durch die
Inhibierung des Hsp90α sterben die Zellen ab wodurch die Entstehung von
Krebs verhindert wird. Aufgrund dieser molekularen Zusammenhänge ist die
Suche und die Analyse von Inhibitoren für Hitzeschockproteine in den Fokus
medizinischer Forschung gerückt. 6 Die Suche nach möglichen Inhibitoren soll
kosten- und materialschonend sowie schnell durchführbar sein. Durch soge-
nannte High-Throughput-Screenings wäre eine schnelle, effiziente, paralleli-
sierte und miniaturisierte Analyse möglich. Das Protein Microarray-Format
liefert diese Eigenschaften. Auf einem einzigen Microarray können sehr viele
Proteine nebeneinander immobilisiert werden und seine mögliche Einteilung
in 16 Subarrays erlaubt ein paralleles Screening verschiedener Substanzen o-
der Konzentrationsabhängigkeiten.

1.1 Zielsetzung

Das Ziel dieser Masterarbeit im Fach Bioprozesstechnik ist die Herstellung
eines bakteriellen Hitzeschockproteins und die Entwicklung eines direkt-kom-
petitiven Inhibitor-Screenings für Hitzeschockproteine im Microarray-For-
mat.

Hierzu ist die Arbeit in zwei Teile gegliedert. Zuerst soll das Hitze-
schockprotein HtpG aus H. pylori als rekombinantes Protein selbstständig dar-
gestellt werden. Dafür muss das htpg Gen in einen Expressionsvektor kloniert,
anschließend überexprimiert und das Protein aufgereinigt werden. Im zweiten

4 Hartl, F. U. et al. (2011)
5 Homuth, G. et al. (200)
6 Li, Y. et al. (2006)